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                甘露醇高鹽瓊脂培養基原理和使用方法

                丁鑫鑫
                錄入時間:2019-9-27 14:11:47 來源:青島海博生物

                一、試驗原理:

                用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養。

                蛋白胨和牛肉粉提供氮源、維生素和生長因子;D—甘露醇為可發酵糖類;7.5%濃度氯化鈉可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生長;瓊脂是培養基的凝固劑;酚紅為pH指示劑。

                二、培養基配方(g/L):

                蛋白胨

                10.0

                牛肉粉

                1.0

                D-甘露醇

                10.0

                氯化鈉

                75.0

                酚紅

                0.025

                瓊脂

                13.0

                pH 7.4±0.2 25℃

                三、試驗方法:

                粉體裝培養基的使用:

                1.稱取本品109.0g,加入1000ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌煮沸1分鐘。121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻至45-50℃左右時,傾入無菌平皿,備用。

                2.使用前,把制備好的平板放置室溫10-20分鐘。

                3.制備質控菌液。

                4.選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻涂布于平板上,每一稀釋度接種兩個平板。

                5.用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表面劃六條平行直線,同時接種兩個平板。

                6.36±1℃倒置培養基培養24-48小時,記錄實驗結果。

                四、結果觀察與解釋:

                接種以下質控菌株,36±1℃倒置培養基培養24-48小時:

                質控菌株

                菌株編號

                接種量(CFU)

                參比或計數培養基

                方法

                質控評定標準

                其他特征

                大腸埃希氏菌

                ATCC25922

                100-1000

                /

                半定量

                G≤1

                部分或完全抑制

                鼠傷寒沙門氏菌

                ATCC14028

                100-1000

                /

                半定量

                G≤1

                部分或完全抑制

                表皮葡萄球菌

                CMCC(B)26069

                10-100

                TSA

                定量

                PR≥0.7

                紅色菌落

                金黃色葡萄球菌

                ATCC6538

                10-100

                TSA

                定量

                PR≥0.7

                黃色菌落,菌落周圍黃色

                金黃色葡萄球菌

                ATCC25923

                10-100

                TSA

                定量

                PR≥0.7

                黃色菌落,菌落周圍黃色


                圖1-2 甘露醇高鹽瓊脂微生物質控結果

                備注:a:金黃色葡萄球菌(CMCC(B)26003),b:表皮葡萄球菌,c:大腸埃希氏菌,d:金黃色葡萄球菌(ATCC6538),

                e:沙門氏菌


                五、注意事項:

                本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。

                 

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