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    硝酸鹽肉湯(軍團菌)生化管的使用原理及方法

    楊永帥
    錄入時間:2018-10-22 9:48:22 來源:青島海博生物

    實驗原理:

      硝酸鹽培養基中的硝酸鹽可被某些細菌還原為亞硝酸鹽,加入對氨基苯磺酸和α-萘胺試劑,可與亞硝酸鹽反應,產生一種紅色重氮化合物而呈陽性;硝酸鹽還原的最終產物也因細菌種類不同二不同,包括亞硝酸鹽、氨、分子氮和一氧化碳等。若加入對氨基苯磺酸和α-萘胺試劑后不變色,再加入少許鋅粉,如果變紅,說明培養基中的硝酸鹽未被細菌還原而仍然存在,被鋅粉還原為亞硝酸鹽后與對氨基苯磺酸和α-萘胺試劑反應顯紅色,則判定為硝酸鹽還原陰性;如果加入鋅粉后仍然不變紅,說明培養基中的硝酸鹽已被還原成亞硝酸鹽,進而分解成氨、氮等產物,判定為硝酸鹽還原陽性。

    實驗方法:

    1.用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線一圈,掰開待用;

    2.將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他制備方法,制備成5 McFarland濁度(約109CFU/ml)的菌懸液;

    3. 吸取0.05ml-0.08ml(約1-2滴)菌懸液至生化管中,36±1℃培養24-120h后,觀察試驗結果。

    結果判定:

    質控菌株

    菌株編號

    生長情況

    其他特征

    博茲曼軍團菌

    ATCC33217

    +++

    陰性

    大腸埃希氏菌

    ATCC25922

    +++

    陽性


     

    圖1-1  硝酸鹽肉湯(還原)質控結果

    備注:a:博茲曼軍團菌,b:大腸埃希氏菌,c:空白

     

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